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正确制备

培养基

是微生物检验的最基础步骤之一，使用脱水培养基和其他成分，尤其是含有有毒物质（如胆盐或其他选择剂）的成分时，应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。

使用商品化脱水合成培养基制备培养基时，应严格按照厂商提供的使用说明配制。如重量（体积）、pH、制备日期、灭菌条件和操作步骤等。

实验室使用各种基础成分制备培养基时，应按照配方准确配制，并记录相关信息，如：培养基名称和类型及试剂级别、每个成分物质含量、制造商、批号、pH、培养基体积（分装体积）、无菌措施（包括实施的方式、温度及时间）、配置日期、人员等，以便溯源。

培养基的配制记录

每次制备培养基均应有记录，包括培养基名称，配方及其来源，和各种成份的牌号，最终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。

培养基的称量和溶解

小心称量所需量的脱水合成培养基（必要时佩戴口罩或在通风柜中操作，以防吸入含有有毒物质的培养基粉末），先加入适量的水，充分混合（注意避免培养基结块），然后加水至所需的量后适当加热，并重复或连续搅拌使其快速分散，必要时应完全溶解。含琼脂的培养基在加热前应浸泡几分钟。

注意：培养基的加热溶解或高温灭菌盛放使用的容器不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。最好使用不锈钢锅加热溶化，可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时搅动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。

PH的测定和调整

用pH计测pH，必要时在灭菌前进行调整，除特殊说明外，培养基灭菌后冷却至25 ℃时，pH应在标准pH±0.2范围内。一般使用浓度约为40 g/L（约1 mol/L）的氢氧化钠溶液或浓度约为36.5 g/L（约1mol/L）的盐酸溶液调整培养基的pH。如需灭菌后进行调整，则使用灭菌或除菌的溶液。

培养基的分类

培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外还须用防水纸包扎（现试管一般多有用螺旋盖者）。分装时最好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时，分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒，以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中，随该批培养基同时灭菌，以为测定该批培养基最终pH之用。

培养基的灭菌

一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中，如无特殊规定，即可用此法灭菌。

某些热敏成分，如糖类，应另行配成20%或更高的浓液，以过滤或间歇灭菌法消毒，以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和抗生素等则应以无菌操作技术抽取和加入于经冷却约50°C左右的培养基中。琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出，冷至55℃-60℃时，摆置成适当斜面，待其自然凝固。

培养基的质量测试

参见GB4789.28-2013 第6部分 培养基和试剂性能测试方法。通过生物学指标来评估培养基的质量。

培养基的保存

商品化的培养基应按照厂商提供的说明使用。每批培养基均必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签。

据统计，我国不孕不育的育龄夫妇比例已经高达

12%-18%

。这个统计结果是什么概念？也就是说，十对育龄夫妇中，可能就有一对或者两对正在为求子不得而犯愁。

不孕不育率的攀升和现代人生活压力大，作息紊乱存在着一定的关系。

除了一些“丁克”家族外，在结婚成家后，大多数的夫妇都想能够有一个爱的结晶。

有时候就是那么事与愿违，有些女性和丈夫备孕很久却一直无果，有些女性没有计划生育却屡屡“中招”怀孕。

如果你感受不到那些家庭为了求子有多拼，你可以去各地的生殖医院看看，里面多的是眉头紧锁，

为了求子甚至不惜倾家荡产的夫妇。

小胡没想到自己顺遂的人生之路会卡在求子这道坎上，在和丈夫步入婚姻后，小胡一直没有把备孕放在心上。

直到婚后两年，家里人开始催促时，小胡才突然意识到两年来，自己和丈夫夫妻生活从未避孕，却

一直没有怀上。

小胡在家人的建议下，和丈夫到了当地有名的生殖中心就诊，在检查结果出来之后，她傻眼了。

自己的各项指标没有什么问题，而丈夫的精子却“少得可怜”。考虑到小胡丈夫精子的特殊情况，如果他们坚持自然怀孕的话，

成功的概率极低。

因此，医生建议他们去做试管婴儿。刚听到试管这个词时，小胡感觉天都要塌下来了。以前只在电视中听说过试管婴儿，没想到自己也要走上试管求子这条路。

小胡原本想要放弃，但是一想到自己丈夫平时对自己的疼爱，小胡决心不论如何一定要为丈夫生育一个孩子。

就这样，小胡和丈夫开始全面检查、调理身体，进入试管周期。有些人以为做试管婴儿很简单，所以她们在适合生育的年纪，不着急要孩子。

她们认为如果到时候自己怀不上，还有试管婴儿技术能帮忙。其实，

试管远比很多人想要的困难，女性在做试管过程中所承受的煎熬，不是一般人能承受住的。

做试管婴儿过程中要承受的三大“煎熬”，一般人可能承受不住

首先是身体的“煎熬”。

之所以小胡听到试管婴儿一词，感觉眼前一黑，是因为她之前听闻做试管婴儿非常“可怕”。尤其是对于女性而言，在生理方面，确实是一种巨大的考虑。

和自然怀孕的女性相比，通过试管技术怀孕的女性在求子这道关卡上面，确实

吃了不少苦。

除了要

打数百针外

，做试管最让人害怕的莫过于

取卵

的过程了。当女性体内的多个卵子成熟之后，负责取卵的医生会用一根长长的取卵针来取卵。

虽说取卵的过程中可以使用麻醉，但是取卵还是有创口的，对女性的卵巢会有一定的伤害。

有些女性在取卵过后还会出现“腹水”的情况，这是由于女性卵巢被药物过度刺激的缘故。

要知道腹水的症状非常危险，女性会感觉下腹部胀痛，尿液减少，需要积极治疗。

由此可见，做试管婴儿对女性的身体来说，确实是一种煎熬。

其次是心理的“煎熬”。

在进入试管周期后，小胡才明白，相比做试管过程中身体上的疼痛而言，心理上的折磨更让人觉得痛苦、难熬。

刚开始小胡担心自己的卵泡能不能成熟，在多个卵泡成熟之后，小胡又开始担心能够取出来几个，在取出了多个成熟的卵泡之后，小胡的心依旧是悬着的。

毕竟自己丈夫的精子数量是比较少的，为数不多的“小蝌蚪”到底能不能成功和卵子结合形成受精卵？这一切都是未知数。

做试管婴儿过程中的这种不确定性就像一块大石头，一直堵在小胡的心中，让她喘不过气来。

虽然知道在做试管的过程中应该要保证充足的睡眠时间，小胡却总是在深夜焦虑地辗转反侧，难以入眠。

她觉得身体上的疼痛她可以咬咬牙忍过去，但是这种心理上的煎熬，实在是太折磨人了。

最后是经济上的“煎熬”。

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之所以小胡会如此焦虑，以至于失眠，是因为她为了做试管婴儿，已经连续请了很多天的假了。

自己的工作会受到影响不说，小胡和丈夫这次做的是二代试管，促排、取卵、移植等各个流程走下来，

已经花费好几万。

如果这次不成功，那么一切都要重新开始，他们又得准备好几万的资金。

小胡和丈夫两人工作非常拼，好不容易才凑齐了房子的首付，之后还没有什么积蓄。这几万的支出对于他们这个家庭来说，是非常巨大的。

如果这次不成功，

小胡还不知道需要多久他们才能凑出第二次的试管费用。

要知道，试管婴儿的成功率并不是百分之百的。有些夫妇，花费了几十万，还没能如愿地拥有一个属于自己的孩子。

许多女性做试管的焦虑一方面是来源于求子多年不得的着急，另一方面则是来源于经济上面的巨大压力。

这份煎熬，只有经历过的人，才能懂得。

育儿寄语

试管的过程看似简单，却让人备受煎熬。不管怎样，我们还是要感谢试管技术，让许多绝望的家庭又重新看到了希望，让许多夫妇圆了自己的求子梦。

试管婴儿的父母也不必有心理负担，试管婴儿和普通婴儿一样健康、可爱。希望每个想当妈妈的女性都能如愿“好孕”，希望她们在当妈妈的路上，可以少一点艰辛。

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